很可惜 T 。T 您现在还不是作者身份,不能自主发稿哦~
如有投稿需求,请把文章发送到邮箱customer@hrtwrk.com,一经录用会有专人和您联系
咨询如何成为春羽作者请联系:乐艺云栈小羽毛
3分析与讨论
3.1不同试剂盒对集聚性大肠杆菌基因组的肠道肠杆提取效果
分别吸取1 mL培养过夜的集聚性大肠杆菌菌悬液,按照4种细菌基因组提取试剂盒提供的集聚菌基标准方法提取集聚性大肠杆菌基因组,不同试剂盒分别提取的因组集聚性大肠杆菌基因组纯度及浓度见表4。基因组质量浓度在10.8~30.4 mg/L,脱氧提天根试剂盒提取的核糖核酸基因组DNA的质量浓度最低,只有10.8mg/L;宝生物试剂盒提取的比较质量浓度最高,但也仅为30.4 mg/L。改进纯净的肠道肠杆基因组DNA的260 nm处的吸光度A260与280 nm处的吸光度A280的比值1.8,较纯净的集聚菌基基因组DNA的A260与230 nm处的吸光度A230的比值大于2.0,所提取的因组基因组DNA的A260/A280的值小于1.66,可能样品有蛋白质污染;A260/A230的脱氧提值小于1.12,推测基因组DNA样品可能含有有机试剂或盐离子等污染物。核糖核酸
琼脂糖凝胶电泳检测结果如图1所示。比较4种试剂盒所提取的改进基因组条带完整性良好,无核糖核酸(RNA)污染,肠道肠杆但是用4种方法所提取的基因组的浓度均较低。制备核酸标准样品时前期的基因组样品提取工作将耗费大量的资源,为提高产率,需要对提取步骤进行必要的优化。从使用4种试剂盒提取EAEC基因组DNA的提取工作耗时由短到长的顺序是宝生物、天根、全式金、OMEGA,其中OMEGA试剂盒提取过程耗时最长,天根试剂盒提取浓度过低。从试剂盒购买价格考虑,OMEGA试剂盒(50次)花费648.00元,而天根试剂盒(50次)花费420.00元;但是该试剂盒需自备RNase A,总费用合计720.00元,在4种试剂盒中价格最高,因此,后续研究将对宝生物试剂盒及全式金试剂盒标准提取方法进行优化。
3.2宝生物试剂盒提取集聚性大肠杆菌基因组方法优化
使用宝生物试剂盒标准提取方法中的革兰氏阳性菌提取方法,并且增加了对于菌悬液的处理过程。取1 mL培养过夜的EAEC菌悬液,离心分离弃上清后加入500µL的Buffer BS试剂,加入溶菌酶至终质量浓度为2 g/L。在第一步的材料处理时加入蛋白酶K后在56℃的孵育时间由原来的30 min延长至40 min。
优化后宝生物试剂盒提取的EAEC基因组的纯度及浓度见表5。优化后宝生物试剂盒提取的EAEC基因组的质量浓度为34.1 mg/L,与优化前的提取质量浓度30.4mg/L相比,浓度提高较少,提取过程耗时较优化前增长了1.5 h,基因组A260/A280及A260/A230的值低于优化前。电泳分析结果如图2所示。可以看出,优化后提取的基因组条带清晰,无RNA污染,说明优化后提取基因组效果未能达到快速提取大量高质量基因组的目的。
声明:本文所用图片、文字来源《济南大学学报》第35卷第2期,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系
相关链接:试剂盒,琼脂,溶菌酶,电泳
本文为作者独立观点,不代表乐艺云栈立场,未经允许不得转载。
我们致力于提供一个高质量内容的交流平台。为落实国家互联网信息办公室“依法管网、依法办网、依法上网”的要求,为完善跟帖评论自律管理,为了保护用户创造的内容、维护开放、真实、专业的平台氛围,我们团队将依据本公约中的条款对注册用户和发布在本平台的内容进行管理。平台鼓励用户创作、发布优质内容,同时也将采取必要措施管理违法、侵权或有其他不良影响的网络信息。
一、根据《网络信息内容生态治理规定》《中华人民共和国未成年人保护法》等法律法规,对以下违法、不良信息或存在危害的行为进行处理。
1. 违反法律法规的信息,主要表现为:
1)反对宪法所确定的基本原则;
2)危害国家安全,泄露国家秘密,颠覆国家政权,破坏国家统一,损害国家荣誉和利益;
3)侮辱、滥用英烈形象,歪曲、丑化、亵渎、否定英雄烈士事迹和精神,以侮辱、诽谤或者其他方式侵害英雄烈士的姓名、肖像、名誉、荣誉;
4)宣扬恐怖主义、极端主义或者煽动实施恐怖活动、极端主义活动;
5)煽动民族仇恨、民族歧视,破坏民族团结;
6)破坏国家宗教政策,宣扬邪教和封建迷信;
7)散布谣言,扰乱社会秩序,破坏社会稳定;
8)宣扬淫秽、色情、赌博、暴力、凶杀、恐怖或者教唆犯罪;
9)煽动非法集会、结社、游行、示威、聚众扰乱社会秩序;
10)侮辱或者诽谤他人,侵害他人名誉、隐私和其他合法权益;
11)通过网络以文字、图片、音视频等形式,对未成年人实施侮辱、诽谤、威胁或者恶意损害未成年人形象进行网络欺凌的;
12)危害未成年人身心健康的;
13)含有法律、行政法规禁止的其他内容;
2. 不友善:不尊重用户及其所贡献内容的信息或行为。主要表现为:
1)轻蔑:贬低、轻视他人及其劳动成果;
2)诽谤:捏造、散布虚假事实,损害他人名誉;
3)嘲讽:以比喻、夸张、侮辱性的手法对他人或其行为进行揭露或描述,以此来激怒他人;
4)挑衅:以不友好的方式激怒他人,意图使对方对自己的言论作出回应,蓄意制造事端;
5)羞辱:贬低他人的能力、行为、生理或身份特征,让对方难堪;
6)谩骂:以不文明的语言对他人进行负面评价;
7)歧视:煽动人群歧视、地域歧视等,针对他人的民族、种族、宗教、性取向、性别、年龄、地域、生理特征等身份或者归类的攻击;
8)威胁:许诺以不良的后果来迫使他人服从自己的意志;
3. 发布垃圾广告信息:以推广曝光为目的,发布影响用户体验、扰乱本网站秩序的内容,或进行相关行为。主要表现为:
1)多次发布包含售卖产品、提供服务、宣传推广内容的垃圾广告。包括但不限于以下几种形式:
2)单个帐号多次发布包含垃圾广告的内容;
3)多个广告帐号互相配合发布、传播包含垃圾广告的内容;
4)多次发布包含欺骗性外链的内容,如未注明的淘宝客链接、跳转网站等,诱骗用户点击链接
5)发布大量包含推广链接、产品、品牌等内容获取搜索引擎中的不正当曝光;
6)购买或出售帐号之间虚假地互动,发布干扰网站秩序的推广内容及相关交易。
7)发布包含欺骗性的恶意营销内容,如通过伪造经历、冒充他人等方式进行恶意营销;
8)使用特殊符号、图片等方式规避垃圾广告内容审核的广告内容。
4. 色情低俗信息,主要表现为:
1)包含自己或他人性经验的细节描述或露骨的感受描述;
2)涉及色情段子、两性笑话的低俗内容;
3)配图、头图中包含庸俗或挑逗性图片的内容;
4)带有性暗示、性挑逗等易使人产生性联想;
5)展现血腥、惊悚、残忍等致人身心不适;
6)炒作绯闻、丑闻、劣迹等;
7)宣扬低俗、庸俗、媚俗内容。
5. 不实信息,主要表现为:
1)可能存在事实性错误或者造谣等内容;
2)存在事实夸大、伪造虚假经历等误导他人的内容;
3)伪造身份、冒充他人,通过头像、用户名等个人信息暗示自己具有特定身份,或与特定机构或个人存在关联。
6. 传播封建迷信,主要表现为:
1)找人算命、测字、占卜、解梦、化解厄运、使用迷信方式治病;
2)求推荐算命看相大师;
3)针对具体风水等问题进行求助或咨询;
4)问自己或他人的八字、六爻、星盘、手相、面相、五行缺失,包括通过占卜方法问婚姻、前程、运势,东西宠物丢了能不能找回、取名改名等;
7. 文章标题党,主要表现为:
1)以各种夸张、猎奇、不合常理的表现手法等行为来诱导用户;
2)内容与标题之间存在严重不实或者原意扭曲;
3)使用夸张标题,内容与标题严重不符的。
8.「饭圈」乱象行为,主要表现为:
1)诱导未成年人应援集资、高额消费、投票打榜
2)粉丝互撕谩骂、拉踩引战、造谣攻击、人肉搜索、侵犯隐私
3)鼓动「饭圈」粉丝攀比炫富、奢靡享乐等行为
4)以号召粉丝、雇用网络水军、「养号」形式刷量控评等行为
5)通过「蹭热点」、制造话题等形式干扰舆论,影响传播秩序
9. 其他危害行为或内容,主要表现为:
1)可能引发未成年人模仿不安全行为和违反社会公德行为、诱导未成年人不良嗜好影响未成年人身心健康的;
2)不当评述自然灾害、重大事故等灾难的;
3)美化、粉饰侵略战争行为的;
4)法律、行政法规禁止,或可能对网络生态造成不良影响的其他内容。
二、违规处罚
本网站通过主动发现和接受用户举报两种方式收集违规行为信息。所有有意的降低内容质量、伤害平台氛围及欺凌未成年人或危害未成年人身心健康的行为都是不能容忍的。
当一个用户发布违规内容时,本网站将依据相关用户违规情节严重程度,对帐号进行禁言 1 天、7 天、15 天直至永久禁言或封停账号的处罚。当涉及欺凌未成年人、危害未成年人身心健康、通过作弊手段注册、使用帐号,或者滥用多个帐号发布违规内容时,本网站将加重处罚。
三、申诉
随着平台管理经验的不断丰富,本网站出于维护本网站氛围和秩序的目的,将不断完善本公约。
如果本网站用户对本网站基于本公约规定做出的处理有异议,可以通过「建议反馈」功能向本网站进行反馈。
(规则的最终解释权归属本网站所有)
Powered by © 2010-2022 乐艺云栈 粤ICP备77645321号